Каталаза – це фермент, який перетворює перекис водню на воду і кисень. Тест простий у виконанні; бактерії просто змішуються з H2O2. Якщо з’являються бульбашки (через утворення кисню), це означає, що бактерії каталазопозитивні. Якщо бульбашки не з’являються, бактерії каталазонегативні.
Цей тест використовується для ідентифікації організмів, які виробляють фермент каталазу. Цей фермент детоксикує перекис водню, розщеплюючи його на воду та кисень. Бульбашки, що утворюються в результаті утворення газоподібного кисню, чітко вказують на каталазопозитивний результат.
За допомогою лупи або мікроскопа спостерігайте слабкі позитивні реакції. Відсутність утворення бульбашок (немає ферменту каталази для гідролізу перекису водню) означає каталазонегативну реакцію (рис. 2B). Контроль якості виконується за допомогою організмів, відомих як позитивних, так і негативних на каталазу.
Помістіть кювету в спектрофотометр і дайте субстрату врівноважитись до 25 °C. Потім додайте в кювету 0,10 мл розчину каталази. Негайно перемішайте за допомогою інверсії та стежте за зменшенням поглинання, знімаючи один результат на секунду протягом ~180 секунд.
Тест на каталазу
- Візьміть предметне скло і флакон з перекисом водню.
- Використовуючи стерилізовану інокуляційну петлю, нанесіть невелику кількість бактерій на сухе предметне скло.
- Помістіть краплю перекису водню поверх бактерій.
- Негайно шукайте бульбашки: бульбашки = каталаза позитивна. немає бульбашок = каталаза негативна.