Розрахунок PFU Розділіть кількість бляшок на коефіцієнт розведення, (приклад 10–6 для найбільш розведеного зразка), щоб отримати кількість одиниць утворення бляшок (PFU) у 100 мкл фагової суміші. Примітка. У разі виконання аналізу в трьох повторах використовуйте середню кількість бляшок із трьох планшетів. 23 вересня 2019 р.
Щоб визначити титр вірусу, бляшки підраховуються. Щоб мінімізувати помилку, підраховуються лише чашки, що містять від 10 до 100 бляшок, залежно від розміру використовуваної чашки для культури клітин. Згідно зі статистичними принципами, коли підраховано 100 бляшок, титр зразка змінюватиметься на плюс-мінус 10%.
Обчисліть одиниці формування зубного нальоту (PFU)/мл за такою формулою: PFU/мл = 𝑁 × 1/𝐷𝐹 × 1/V. N – кількість бляшок лізису, підрахована на планшеті (виражена як PFU); DF — коефіцієнт розведення, а V — об’єм розведення фагу, налитого на планшет.
Розчин дорівнює концентрації відомого розчину, помноженій на об’єм відомого розчину, поділеному на об’єм невідомого. Рішення.
Аналіз зубного нальоту є використовується для підрахунку інфекційних частинок. Зразки розводять і аліквоти кожного розведення додають до культивованих клітин. Клітини покриті агарозним покриттям. Вірус, що виробляється з інфікованої клітини, може заразити сусідні клітини.
Формула для розрахунку титру вірусу: титр = {(F × Cn) /V} × DF F: частота GFP-позитивних клітин, визначена проточною цитометрією; Cn: Загальна кількість заражених клітин-мішеней. V: Об'єм інокулята.